Поиск
Корзина
Товаров в корзине: 0
На сумму: 0 р
Главная Новости Антиоксидантные свойства экстрактов

Антиоксидантные свойства экстрактов

      
ВВЕДЕНИЕ
Антиоксиданты являются основными регуляторами свободнорадикальных превращений в организме. Поэтому антиоксидантная активность в настоящее время является одной из наиболее важных и востребованных характеристик веществ. Наши исследования заключаются в его определении методом оптической спектрофотометрии, основанным на реакции с дифенилпикрилгидразилом (ДФПГ). Основным объектом наших исследований являются экстракты из природного сырья, а именно экстракты коры деревьев.
В процессе метаболизма в клетке образуются и накапливаются активные формы кислорода (АФК). Они играют двоякую роль в организме человека. С одной стороны, являясь сигнальными молекулами, они служат для построения и обновления структурных элементов клеточных мембран. С другой стороны, избыточное количество АФК, которые по своей природе являются радикалами, может привести к окислению важных органических молекул в организме и вызвать мутацию клеток и генов. Таким образом, АФК вызывают деструктивные реакции в организме, способствуя возникновению многих заболеваний и ускоряя процессы старения организма.
Регуляция процессов окисления и уровня АФК, накапливающихся в клетках организма, осуществляется антиоксидантной системой. При воздействии на организм человека неблагоприятных факторов окружающей среды, повышенных физических и эмоциональных нагрузках, а также при длительных заболеваниях и в процессе старения развивается оксидативный стресс. Антиоксидантная система перестает справляться со своей функцией регулятора содержания оксидантов, не может полностью подавить избыточные реакции окисления, поэтому возникает необходимость введения в организм человека дополнительных веществ, обладающих антиоксидантными свойствами.
Для этого необходимо иметь информацию как о состоянии антиоксидантной системы организма, так и об антиоксидантной активности (АОА) принимаемых препаратов, БАДов, продуктов питания и напитков. Поэтому изучение растительных экстрактов как природных источников антиоксидантов является актуальной задачей на сегодняшний день.

Существует ряд методов определения антиоксидантной активности. На сегодняшний день наибольшее распространение получили оптические, электрохимические и хроматографические методы исследования. Среди существующих методов исследования АОА следует отметить оптические методы как наиболее простые и информативные.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектом исследования являются экстракты из природного сырья, производимые ООО «АРАЛ» в Свердловской области: экстракты лиственницы (лат. larix), сосны (лат. pinus) и коры кедра (лат. cedrus), экстракт чаги (лат. . inonotus obliquus), а также смесь экстракта коры сосны и экстракта чаги. В качестве препарата сравнения использовали государственный стандартный образец кверцетина; для более наглядного отображения результатов исследования также было проведено сравнение с экстрактом шиповника, широко используемым в питании.
Исследование АОА проводили спектрофотометрическим методом, основанным на реакции с дифенилпикрилгидразилом (ДФПГ).
Исходные растворы исследуемых экстрактов получали разведением 100 мг экстракта в 100 мл горячей некипящей воды. Концентрация полученного раствора составляет 1 мг/мл. Рабочие растворы экстрактов получали разбавлением исходного раствора. Конечные концентрации исследуемых экстрактов составляли 10, 20, 50, 100 и 200 мкг/мл. В случае плодов шиповника конечные концентрации составляют 10, 50, 100, 200, 500 и 800 мкг/мл.

Раствор кверцетина готовили, разбавляя 2 мг (точная навеска) кверцетина в 20 мл 95%-ного этанола. Концентрация полученного раствора составляет 0,01 мг/мл. Рабочие растворы кверцетина готовили разбавлением исходного, конечные концентрации составляли 0,2, 0,5, 1, 2, 5 и 10 мкг/мл.
Раствор ДФПГ готовили, разбавляя 2 мг (точная навеска) ДФПГ в 50 мл 95%-ного этанола, пробирку заворачивали в алюминиевую фольгу и убирали в темное место. Концентрация полученного раствора составляет 0,04 мг/мл.
Анализируемые пробы состояли из 0,5 мл рабочего раствора соответствующего экстракта или кверцетина, 1,5 мл этанольного раствора ДФПГ (концентрация 0,04 ммоль в 95%-ном этаноле) и 1,5 мл 95%-ного этанола.

Контрольная проба при исследовании экстрактов состояла из 0,5 мл фильтрованной кипяченой воды, 1,5 мл этанольного раствора ДФПГ и 1,5 мл 95%-ного этанола. Для определения АОА кверцетина контрольная проба состояла из 1,5 мл этанольного раствора ДФПГ и 2 мл 95%-ного этанола.

Образцы выдерживали 30 мин в темном месте, после чего измеряли оптическую плотность на спектрофотометре ПЭ-5400УФ (ООО «Экохим», Санкт-Петербург) при длине волны 517 нм.

По полученным значениям оптической плотности анализируемых образцов рассчитывали процент ингибирования ДФПГ. Величину ингибирования радикала ДФПГ (в %) рассчитывали как отношение разности оптической плотности контрольного и анализируемого образцов к оптической плотности контрольного образца.

АОА исследуемых экстрактов и препарата сравнения (кверцетина) оценивали по показателю IC50, соответствующему концентрации исследуемого вещества (мкг/мл), при которой происходит 50% восстановление радикала ДФПГ. Это значение было найдено путем решения уравнения линии тренда, аппроксимирующего наши результаты.
Яндекс.Метрика